Най – важния етап от инвитро е оплождането на яйцеклетките.
Оплождането е осъществяването на контакт между половите клетки в подходяща среда. Стандартния метод е IVF (In vitro fertilization).
Яйцеклетката и сперматозоидите се поставят заедно в специална среда. Оплождането става спонтанно между тях. На следващия ден всяка яйцеклетка се изследва за признаци на оплождане.
Ако има такова в центъра на яйцеклетката се наблюдава образуване на два пронуклеуса. Единият от тях съдържа генетичният материал от яйцеклетката, а другият – от сперматозоида.
Възможно е обаче да няма нито една оплодена яйцеклетка. Ако това се случи, ембриолозите следва да направят интрацитоплазмено инжектиране на сперматозоид в яйцеклетката (ICSI), за да се получат ембриони за трансфер.
Когато броя на сперматозоидите е намален се прилага методът ICSI.
Дали ще се приложи стандартен IVF метод или ICSI могат да преценят биологът и акушер-гинекологът след предварителен спермален анализ.